Transformación Mediada Mejorada en Repollo Chino a través de Tenoxicam, Optimización de Fitohormonas y Reporteros Visuales
Autores: Wang, Shubin; Liu, Shuantao; Wang, Ronghua; Zhang, Zhigang; Xu, Nianfang; Li, Qiaoyun; Zhao, Zhizhong
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2025
Acceso abierto
Artículo científico
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Botánica
Palabras clave
Genómica
Transformación
Infección
Antibiótico
Regeneración
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CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 8
Citaciones: Sin citaciones
La col china (ssp.) es un vegetal de hoja de importancia global, pero la investigación en genómica funcional sobre su resistencia a la transformación genética mediada por - es severamente limitada. En este estudio, demostramos que tanto la infección como la selección de antibióticos inhiben significativamente la regeneración del pecíolo cotiledonar, representando un principal obstáculo para la transformación de alto rendimiento. La infección con diferentes cepas suprimió el brote regenerado por explante entre un 30.98% y un 69.16%. Suministrar el inhibidor de señalización del ácido salicílico tenoxicam en el medio de germinación de semillas aumentó la regeneración post-infección hasta un 37.90%. En comparación con los controles no infectados, la concentración óptima de NAA para la regeneración de explantes después de la infección fue mayor, y 0.5 mg/L aumentó la regeneración post-infección en un 27.66%. Reemplazar los marcadores seleccionables por antibióticos con el reportero visual eYGFPuv o RUBY eliminó la fitotoxicidad, redujo los brotes falsos positivos y elevó aún más la eficiencia de transformación al 19.33-20.00% (frente al 2.67-6.67% bajo selección de antibióticos). El protocolo integrado produjo líneas estables sobreexpresando RUBY, cuya biomasa disminuyó con el aumento de los niveles de transcripción. Restringir la expresión de RUBY a las hojas internas de la cabeza generó un nuevo germoplasma con menos penalización en el rendimiento. Este trabajo proporciona un método de transformación de alta eficiencia que acelerará el descubrimiento de genes y la edición del genoma en la col china.
Descripción
La col china (ssp.) es un vegetal de hoja de importancia global, pero la investigación en genómica funcional sobre su resistencia a la transformación genética mediada por - es severamente limitada. En este estudio, demostramos que tanto la infección como la selección de antibióticos inhiben significativamente la regeneración del pecíolo cotiledonar, representando un principal obstáculo para la transformación de alto rendimiento. La infección con diferentes cepas suprimió el brote regenerado por explante entre un 30.98% y un 69.16%. Suministrar el inhibidor de señalización del ácido salicílico tenoxicam en el medio de germinación de semillas aumentó la regeneración post-infección hasta un 37.90%. En comparación con los controles no infectados, la concentración óptima de NAA para la regeneración de explantes después de la infección fue mayor, y 0.5 mg/L aumentó la regeneración post-infección en un 27.66%. Reemplazar los marcadores seleccionables por antibióticos con el reportero visual eYGFPuv o RUBY eliminó la fitotoxicidad, redujo los brotes falsos positivos y elevó aún más la eficiencia de transformación al 19.33-20.00% (frente al 2.67-6.67% bajo selección de antibióticos). El protocolo integrado produjo líneas estables sobreexpresando RUBY, cuya biomasa disminuyó con el aumento de los niveles de transcripción. Restringir la expresión de RUBY a las hojas internas de la cabeza generó un nuevo germoplasma con menos penalización en el rendimiento. Este trabajo proporciona un método de transformación de alta eficiencia que acelerará el descubrimiento de genes y la edición del genoma en la col china.