El Qingke (L. var. Hook. f.), un cultivo básico en la meseta tibetana, sufre una reducción severa en el rendimiento bajo cultivo continuo (en un 38.67%), sin embargo, los mecanismos subyacentes siguen siendo poco claros. Este estudio investigó sistemáticamente los efectos del cultivo continuo durante 23 años (23y-CC) en la dinámica de nutrientes, el metabolismo de carbohidratos y las actividades enzimáticas en las hojas de Qingke a través de cinco etapas de desarrollo (T1: plántula; T2: macollamiento; T3: unión; T4: floración; T5: llenado). En comparación con el control (plantación del primer año), el 23y-CC redujo significativamente los contenidos de nitrógeno (N), fósforo (P) y potasio (K) en las hojas en un 60.94%, 47.96% y 60.82%, respectivamente, en las primeras etapas de crecimiento. Las principales enzimas que metabolizan nitrógeno, incluyendo la glutamato sintasa (GOGAT), la glutamina sintasa (GS) y la nitrato reductasa (NR), mostraron actividades reducidas bajo el 23y-CC, lo que indica una asimilación de nitrógeno deteriorada. El perfil de carbohidratos reveló contenidos más bajos de almidón y glucosa, pero una mayor acumulación de sacarosa en etapas posteriores (T4-T5) bajo el 23y-CC, acompañado de la desregulación de las actividades de la sacarosa sintasa (SS) y la invertasa. Estos hallazgos elucidan cómo el cultivo continuo interrumpe la homeostasis de nutrientes y la asignación de carbono, comprometiendo en última instancia la productividad del Qingke. Este estudio proporciona nuevas perspectivas sobre estrategias agronómicas para mitigar los obstáculos del cultivo continuo en el Qingke.