La glicosilación que ocurre en lípidos, proteínas o azúcares desempeña roles importantes en muchos sistemas biológicos. En la naturaleza, la glicosilación enzimática es la formación de un enlace glucosídico entre el carbono anomérico del azúcar donante y el grupo funcional del azúcar aceptador. Este estudio encontró anómeros de glicosidos novedosos sin un enlace de carbono anomérico del azúcar donante. Se evaluó una enzima glicosidasa (GH), amilosucrasa de (AS), para glicosilar el ácido ganodérico F (GAF), un triterpeno lanostano de un hongo medicinal, a diferentes niveles de pH. Los resultados mostraron que el GAF fue glicosilado por AS en condiciones ácidas de pH 5 y pH 6, mientras que la actividad disminuyó drásticamente hasta ser indetectable a pH 7 o pH 8. El producto de biotransformación fue purificado mediante cromatografía líquida de alta resolución preparativa e identificado como anómeros inusuales de -glucosil-(226)-GAF y -glucosil-(226)-GAF por espectroscopia de masas y resonancia magnética nuclear (RMN). Además, utilizamos AS para catalizar otros seis triterpenoides. En condiciones ácidas, dos de seis compuestos, ácido ganodérico A (GAA) y ácido ganodérico G (GAG), pudieron ser convertidos en anómeros de -glucosil-(226)-GAA y -glucosil-(226)-GAA y anómeros de -glucosil-(226)-GAG y -glucosil-(226)-GAG, respectivamente. Se confirmó por primera vez que la glicosilación de agliconas de triterpenoides se convierte a través de una enzima GH, AS. La formación de anómeros de glicosidos mediante glicosilación enzimática novedosa abre una nueva bioreacción en la industria farmacéutica y en el sector biotecnológico.