El sistema de transformación transitoria de protoplastos eficiente en plantas es una herramienta importante para estudiar la expresión génica, las vías metabólicas y varios parámetros mutagénicos, pero no se ha establecido en . Como una maleza parásita de raíz que pone en peligro el crecimiento de 29 especies de plantas en 12 familias alrededor del mundo, aún no existe un buen método de control para . Incluso los mecanismos parasitarios de y los genes relacionados que regulan el parasitismo aún no se comprenden. En este estudio, al comparar los factores relacionados con la aislamiento y transfección de protoplastos, desarrollamos el protocolo óptimo para el aislamiento y la transfección de protoplastos en haustorio. El rendimiento óptimo de protoplastos y la actividad fueron de 6.2 x 10 protoplastos/g de peso fresco [FW] y 87.85%, respectivamente, utilizando 0.5 mol/L de manitol, concentraciones enzimáticas de 2.5% de celulasa R-10 y 0.8% de Macerozyme R-10 a 24 grados C durante 4 h. Al mismo tiempo, la eficiencia de transfección de los protoplastos alcanzó el 78.49% al usar 30 g de plásmido, una concentración de 40% de polietileno glicol (PEG), una temperatura de incubación de 24 grados C y un tiempo de transfección de 20 min. Este es el primer sistema eficiente de aislamiento y transformación transitoria de protoplastos de haustorio, sentando una base para futuros estudios sobre la función génica y los mecanismos de formación de haustorios en plantas parásitas.