La cría de tolerancia a través de la ingeniería genética, análisis de secuencias y ómicas, y procesos de identificación de genes se utiliza ampliamente para sintetizar biocombustibles. La mayoría de los mecanismos relacionados han demostrado producir genes endógenos con alta expresión. Sin embargo, el proceso fue lento y laborioso, lo que significa que hay una necesidad de abordar los problemas asociados con el método de cribado de bajo rendimiento y el consumo significativo de tiempo y dinero. En este estudio, se propuso y aplicó una combinación del método de cribado limitado (método LMS) y la ingeniería de tolerancia a productos. Se construyó la biblioteca de ADN genómico MG1655 utilizando el método de escopeta. Luego, las culturas se incubaron a concentraciones de 0.25%, 0.5%, 0.75% y 1.0% de pineno con diferentes efectos inhibitorios. Finalmente, se encontró que los genes , , y estaban asociados con la tolerancia mejorada al pineno. Usando el sistema de escisión I-SceI, se reemplazaron los promotores de los genes , y con P37. La cepa final aumentó la producción de pineno a partir de glucosa en 2.1 veces.