Como una importante molécula de señalización bioactiva, el óxido nítrico (NO) participa en las respuestas de las plantas a diversos estreses ambientales. El objetivo de este estudio fue investigar la influencia del NO exógeno en el crecimiento y la acumulación de cadmio (Cd) en la alfalfa durante el crecimiento temprano. Los resultados mostraron que el Cd inhibió significativamente el crecimiento de las plántulas de alfalfa e indujo la peroxidación de lípidos de membrana. La adición de nitroprusiato de sodio (SNP, como donante de NO) promovió significativamente el crecimiento de las plántulas e indujo la movilización de las reservas de fotosintatos de las semillas, lo que llevó a un aumento en el contenido de azúcares solubles totales (SS) y azúcares reductores (RS). La aplicación de SNP mitigó el daño por peroxidación de membranas causado por el estrés de Cd al aumentar las actividades de catalasa (CAT), peroxidasa de ascorbato (APX), superóxido dismutasa (SOD) y peroxidasa (POD) para eliminar especies reactivas de oxígeno (ROS), mejorando así la resistencia al Cd y aumentando la acumulación de Cd en la alfalfa. Este efecto promotor del SNP dependió de su concentración; se encontró que la concentración óptima de SNP para promover el crecimiento y la absorción de Cd en la alfalfa bajo estrés de Cd era de 200 uM. El peso fresco (FW), el peso seco (DW) y la acumulación de Cd de las plántulas tratadas con 200 uM de SNP aumentaron significativamente en un 23.10%, 30.32% y 82.50%, respectivamente, en el quinto día, en comparación con el tratamiento solo con Cd.