Se analizaron los cariotipos de cuatro especies de triclados de agua dulce del género Girardia (Platyhelminthes): G. schubarti, G. tigrina, G. anderlani y G. biapertura, provenientes de poblaciones de diferentes localidades del estado de Rio Grande do Sul, en el sur de Brasil. Se presenta por primera vez el cariotipo de G. biapertura. Se encontraron tres complementos cromosómicos básicos de 4, 8 y 9 cromosomas. Se detectaron con frecuencia especímenes diploides, triploides o mixoploides (2n/3n) en estas poblaciones. El complemento cromosómico básico de n = 9 se verificó en dos especies diferentes (G. biapertura y G. anderlani), que presentan un cromosoma acrocéntrico grande, poco común en la familia Dugesiidae. También se detectó variabilidad cromosómica intra e interespecífica, y se discuten sus implicaciones evolutivas.