Los híbridos intergenéricos de la subtribu (Orchidaceae), como (.), tienen un gran valor ornamental, debido a su tamaño compacto, con una gran diversidad de colores y flores. La inducción artificial de poliploidia aporta beneficios agronómicos, ornamentales y genéticos a las plantas. La eficiencia de la poliploidia depende de factores como el tipo de antimitótico, el método de poliploidia, las concentraciones, los tiempos de exposición y el tipo de explante. Este estudio tuvo como objetivo desarrollar un protocolo para poliploidear orquídeas, probando dos tipos de explantes (semillas y protocormos), concentraciones y tiempos de exposición a la colchicina. También se investigaron los efectos de la colchicina en el desarrollo in vitro de los explantes. Las respuestas de los explantes a la colchicina dependieron de las concentraciones, el tiempo de exposición y la interacción de estos factores. El análisis por citometría de flujo evidenció una alta endopoliploidia y permitió la separación de plantas poliploidizadas (picos de 4C, 8C y 16C) de plantas no poliploidizadas (solo picos de 2C y 4C). El mayor porcentaje de plantas poliploides se regeneró a partir de protocormos (16.4%) tratados con colchicina en lugar de semillas (3.2%). Los protocormos tratados con colchicina a 500-750 M durante 18 h resultaron en el mejor porcentaje de poliploidia. Además, se reportó una poliploidia natural in vitro utilizando protocormos (11.5%). Los análisis citológicos permitieron estimar el número de cromosomas de los progenitores (70), poliploidizados (140) y progenie no poliploidizada (70).