El aumento de la demanda energética y la reducción de la disponibilidad de fuentes de energía no renovables, junto con el aumento de la concienciación medioambiental de la población, han estimulado la búsqueda de fuentes de energía alternativas. El presente estudio tuvo como objetivo producir biomasa a partir de la microalga Spirulina platensis y evaluar la síntesis in situ de ésteres alquílicos mediante transesterificación/esterificación ácida de biomasa para producir biodiésel. Se ensayaron dos alcoholes (etanol y metanol) y dos cosolventes (hexano y cloroformo), a diferentes temperaturas (30, 45, 60, 75 y 90°C) y tiempos de reacción (10, 20, 30, 60 y 120 min). El análisis factorial de la varianza detectó una interacción entre los factores (P<0,05): temperatura, tiempo de reacción, alcohol y cosolvente. Los mejores rendimientos se obtuvieron con la combinación de etanol y cloroformo a 60°C, tras 30 min de reacción, y con hexano a 45°C, tras 10 min de reacción. La transesterificación/esterificación in situ de biomasa de algas para formar ésteres para la producción de biodiésel añade una dinámica no convencional al uso de esta materia prima.