Protocolo de micropropagación y estabilidad genética de las plantas cultivadas in vitro
Autores: Parzymies, Marzena; Pogorzelec, Magdalena; Gbocka, Katarzyna; Sliwinska, Elwira
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Subcategoría
Biología
Palabras clave
Especies
Cultivo de tejidos
Micropropagación
Desinfección
Estabilidad genética
Reintroducción
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 33
Citaciones: Sin citaciones
L. es una especie relicta, amenazada de extinción en muchos países europeos. Para prevenir la pérdida de la especie, se estableció un cultivo de tejidos para producir material vegetal para la reintroducción en hábitats naturales. Se eligió la micropropagación como método para obtener nuevas plantas. Los brotes se desinfectaron con NaOCl, AgNO, o con una desinfección en dos pasos con NaOCl, y luego se colocaron en medio MS suplementado con BA a 1 mg·dm y IBA a 0.1 mg·dm. Los brotes regenerados se cultivaron en presencia de BA, KIN y 2iP para seleccionar el tratamiento con la tasa de multiplicación más alta. Las plantas obtenidas se aclimatizaron a condiciones ex vitro. Se realizaron análisis de repetición de secuencias inter-simples (ISSR) y análisis citométricos de flujo en plantas regeneradas in vitro para verificar su estabilidad genética. Los mejores resultados de desinfección se obtuvieron cuando los explantes fueron tratados con 1.5% de NaOCl durante 20 minutos. La tasa de multiplicación más alta y plantas de buena calidad se observaron en los medios de control, sin reguladores de crecimiento y en presencia de kinetina a 0.5 mg·dm. La citometría de flujo y los análisis de ISSR confirmaron la estabilidad genética en los plantones, lo que indicó la posibilidad de utilizar las plantas obtenidas in vitro para la reintroducción.
Descripción
L. es una especie relicta, amenazada de extinción en muchos países europeos. Para prevenir la pérdida de la especie, se estableció un cultivo de tejidos para producir material vegetal para la reintroducción en hábitats naturales. Se eligió la micropropagación como método para obtener nuevas plantas. Los brotes se desinfectaron con NaOCl, AgNO, o con una desinfección en dos pasos con NaOCl, y luego se colocaron en medio MS suplementado con BA a 1 mg·dm y IBA a 0.1 mg·dm. Los brotes regenerados se cultivaron en presencia de BA, KIN y 2iP para seleccionar el tratamiento con la tasa de multiplicación más alta. Las plantas obtenidas se aclimatizaron a condiciones ex vitro. Se realizaron análisis de repetición de secuencias inter-simples (ISSR) y análisis citométricos de flujo en plantas regeneradas in vitro para verificar su estabilidad genética. Los mejores resultados de desinfección se obtuvieron cuando los explantes fueron tratados con 1.5% de NaOCl durante 20 minutos. La tasa de multiplicación más alta y plantas de buena calidad se observaron en los medios de control, sin reguladores de crecimiento y en presencia de kinetina a 0.5 mg·dm. La citometría de flujo y los análisis de ISSR confirmaron la estabilidad genética en los plantones, lo que indicó la posibilidad de utilizar las plantas obtenidas in vitro para la reintroducción.