La transformación genética es una herramienta crítica para la manipulación de genes y análisis funcionales en plantas, lo que permite la exploración de fenotipos clave y rasgos agronómicos a nivel genético. Mientras que las plantas dicotiledóneas ofrecen varios tejidos para cultivo y transformación in vitro, las plantas monocotiledóneas, como el arroz, tienen opciones limitadas. Este estudio presenta un método eficiente para transformar genéticamente el arroz (L.) utilizando callos embriogénicos derivados de semillas como explantes. Se utilizaron dos genes objetivo para evaluar la eficiencia de regeneración: la proteína verde fluorescente () y el gen () similar a la manzana (). El antisense se clonó en un vector controlado por el promotor de la alfa-amilasa 3D del arroz (Ramy3D), mientras que se fusionó a Cas9 bajo el promotor Ubi. Estos vectores se introdujeron por separado en callos embriogénicos de arroz de dos cultivares coreanos utilizando transformación mediada por -. Las plántulas transgénicas se regeneraron con éxito mediante selección con higromicina utilizando un sistema de cultivo in vitro. La PCR confirmó la integración estable del transgen en los callos transgénicos y su progenie. La microscopía de fluorescencia reveló la expresión de eGFP, y las líneas que expresan antisense mostraron cambios fenotípicos notables, incluyendo variaciones en la altura de las plantas y la calidad del grano. Se logró una alta eficiencia de transformación y frecuencia de regeneración para ambos cultivares probados. Este estudio demostró el uso efectivo de callos embriogénicos derivados de semillas para la transformación del arroz, ofreciendo un enfoque prometedor para el desarrollo de plantas transgénicas en especies monocotiledóneas.