S. aureus es la causa más común de mastitis, con una tasa de curación significativamente baja. Las características bacterianas como la adhesión y la formación de biopelículas, así como factores extracelulares, pueden afectar la patogénesis de la mastitis estafilocócica. Los objetivos del estudio fueron confirmar, evaluar su resistencia a los antibióticos, identificar genes de resistencia a la meticilina, verificar la formación de biopelículas y detectar genes asociados a biopelículas en muestras de mastitis bovina utilizando PCR múltiple (mPCR). De 215 muestras de leche, seis fueron confirmadas como S. aureus. La mayoría de los aislados fueron sensibles a todos los antibióticos medidos. Un aislado fue identificado como una forma inducible de resistencia a MLSB (resistencia a macrólidos, lincosamidas y estreptogramina B), mientras que los otros dos aislados fueron resistentes a penicilinas y carboxipenicilinas. En cultivos utilizados para el análisis genotípico de resistencia a meticilina por PCR, los genes mecA y mecC no fueron encontrados. Los fenotipos de formación de biopelículas fueron determinados en cuatro cepas. Un análisis de mPCR reveló que todas las cepas de S. aureus llevaban los genes icaA, icaD, bap, fnbA, fnbB y clfA. Solo en un aislado se detectó el gen bap; el gen bap no fue detectado en ninguno de los aislados. Esto enfatiza la importancia de utilizar un tratamiento adecuado y monitoreo continuo de S. aureus para prevenir la propagación de cepas resistentes a antibióticos en las granjas de vacas lecheras.