Dinámicas del Calcio, Expresión de WUSCHEL y Deposición de Calosa durante la Embriogénesis Somática en Embriones Cigóticos Inmaduros
Autores: Calabuig-Serna, Antonio; Mir, Ricardo; Seguí-Simarro, Jose M.
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Botánica
Palabras clave
Inducción
Embriogénesis somática
Dinámica del calcio
Expresión de WUS
Deposición de calosa
Regiones embriogénicas
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 6
Citaciones: Sin citaciones
En este trabajo, estudiamos la inducción de la embriogénesis somática utilizando IZEs como explantes. Caracterizamos el proceso a nivel de microscopía óptica y electrónica de barrido y estudiamos varios aspectos específicos como la expresión de WUS, la deposición de calosa y, principalmente, la dinámica del Ca durante las primeras etapas del proceso de inducción de embriogénesis, mediante análisis FRET confocal con una línea que expresa un sensor de calcio. También realizamos un estudio farmacológico con una serie de químicos conocidos por alterar la homeostasis del calcio (CaCl, inositol 1,4,5-trisfosfato, ionóforo A23187, EGTA), la interacción calcio-calmodulina (clorpromazina, W-7) y la deposición de calosa (2-deoxi-D-glucosa). Mostramos que, después de la determinación de las protrusiones cotiledonarias como regiones embriogénicas, puede emerger un apéndice en forma de dedo de la región apical del brote y se producen embriones somáticos a partir de las células que expresan WUS en la punta del apéndice. Los niveles de Ca aumentan y se deposita calosa en las células de las regiones donde se formarán los embriones somáticos, constituyendo así marcadores tempranos de las regiones embriogénicas. También encontramos que la homeostasis del Ca en este sistema se mantiene estrictamente y no puede ser alterada para modular la producción de embriones, como se ha demostrado en otros sistemas. En conjunto, estos resultados contribuyen a un mejor conocimiento y comprensión del proceso de inducción de embriones somáticos en este sistema.
Descripción
En este trabajo, estudiamos la inducción de la embriogénesis somática utilizando IZEs como explantes. Caracterizamos el proceso a nivel de microscopía óptica y electrónica de barrido y estudiamos varios aspectos específicos como la expresión de WUS, la deposición de calosa y, principalmente, la dinámica del Ca durante las primeras etapas del proceso de inducción de embriogénesis, mediante análisis FRET confocal con una línea que expresa un sensor de calcio. También realizamos un estudio farmacológico con una serie de químicos conocidos por alterar la homeostasis del calcio (CaCl, inositol 1,4,5-trisfosfato, ionóforo A23187, EGTA), la interacción calcio-calmodulina (clorpromazina, W-7) y la deposición de calosa (2-deoxi-D-glucosa). Mostramos que, después de la determinación de las protrusiones cotiledonarias como regiones embriogénicas, puede emerger un apéndice en forma de dedo de la región apical del brote y se producen embriones somáticos a partir de las células que expresan WUS en la punta del apéndice. Los niveles de Ca aumentan y se deposita calosa en las células de las regiones donde se formarán los embriones somáticos, constituyendo así marcadores tempranos de las regiones embriogénicas. También encontramos que la homeostasis del Ca en este sistema se mantiene estrictamente y no puede ser alterada para modular la producción de embriones, como se ha demostrado en otros sistemas. En conjunto, estos resultados contribuyen a un mejor conocimiento y comprensión del proceso de inducción de embriones somáticos en este sistema.