A pesar de que las sustancias húmicas (HS) han sido estudiadas con frecuencia en relación con sus efectos en la salud del ganado, los estudios sobre su influencia en la producción y calidad de huevos, la inmunidad y la microbiota intestinal de las gallinas ponedoras son limitados. En este estudio, se probó la influencia de la suplementación con 0.5% de HS en los parámetros específicos de producción de calidad mineral de la cáscara del huevo, parámetros inmunes (expresión relativa de los genes IgA, IGF-2, MUC-2 en el ciego; actividad de los fagocitos, porcentaje de subpoblaciones de linfocitos seleccionados en la sangre periférica) y número de bacterias ácido lácticas y enterobacterias en el contenido intestinal en las gallinas ponedoras. La adición de 0.5% de HS a la alimentación de las gallinas ponedoras tuvo un efecto positivo en la tasa de puesta de huevos, la masa diaria de huevos, el peso del huevo, la conversión de alimento y la calidad de la cáscara del huevo y también tuvo un efecto inmunestimulante manifestado por el aumento de la actividad de los fagocitos y la respuesta de las células B. Al mismo tiempo, se observó un aumento en el número de enterobacterias en el contenido intestinal y una disminución en la proporción de linfocitos T (<0.05), lo cual puede considerarse como un efecto negativo de HS. Los resultados confirmaron que las HS pueden ser utilizadas para la mejora de la producción de huevos y la inmunestimulación dirigida, pero su efecto en la microbiota intestinal y los linfocitos T deberían ser estudiados con más detalle.