Los surfactantes gemini catiónicos han surgido como agentes potenciales de entrega de genes, ya que pueden coensamblarse con el ADN debido a una fuerte asociación electrostática. Comúnmente, la complejación del ADN se ve potenciada por la inclusión de un lípido auxiliar (HL), que también desempeña un papel clave en la eficiencia de la transfección. La formación de lipoplexes, utilizados como vectores no virales para la transfección, a través de interacciones electrostáticas e hidrofóbicas se ve afectada por varios parámetros fisicoquímicos, como la relación molar de surfactante catiónico:HL, la relación de carga (+/-) y la estructura morfológica de los lipoplexes. En este trabajo, investigamos la capacidad de complejación del ADN de mezclas de surfactantes gemini a base de serina, (nSer)N5, y monooleína (MO) como lípido auxiliar. Los surfactantes de serina formadores de micelas contienen largas cadenas lipofílicas (de 12 a 18 átomos de carbono) y un espaciador de cinco CH, ambos vinculados a los átomos de nitrógeno de los residuos de serina por enlaces de amina. Los agregados (nSer)N5:MO son no citotóxicos hasta 35-90 uM, dependiendo de la relación de mezcla de surfactante y surfactante/MO, y en general, un mayor contenido de MO y una mayor longitud de cadena del surfactante tienden a promover una mayor viabilidad celular. Todos los sistemas complejan eficazmente el ADN, pero el (18Ser)N5:MO se destaca claramente como el de mejor rendimiento. La incorporación de MO en el sistema de surfactantes de serina afecta la morfología y la distribución de tamaño de los agregados mixtos formados. En el régimen de baja concentración, los sistemas gemini-MO se agregan en forma de vesículas, mientras que a altas concentraciones se observa la formación de una fase líquida cristalina lamelar. Esto sugiere que los lipoplexes podrían compartir una estructura similar basada en bicapa.