Las rizobacterias promotoras del crecimiento vegetal (PGPR) como los colonizadores de raíces spp. pueden ser alternativas ideales a los tratamientos químicos de cultivos. Este trabajo buscó extender la aplicación del PGPR ampliamente activo UD1022 a la alfalfa. La alfalfa es susceptible a muchos fitopatógenos, lo que resulta en pérdidas de rendimiento de cultivos y valor nutricional. UD1022 se cocultivó con cuatro cepas patógenas de alfalfa para probar el antagonismo. Encontramos que UD1022 era directamente antagonista hacia , (anteriormente ) y , y no hacia f. sp. . Usando cepas mutantes de UD1022 que carecían de genes en las vías de péptidos no ribosomales (NRP) y de biopelículas, probamos el antagonismo contra StC 306-5 y A2A1. El surfactina NRP puede tener un papel en el antagonismo hacia el ascomiceto StC 306-5. El antagonismo hacia A2A1 puede estar influenciado por componentes de la vía de biopelículas. El regulador central de ambas vías, surfactina y biopelículas, Spo0A, fue necesario para el antagonismo de ambos fitopatógenos. Los resultados de este estudio indican que el PGPR UD1022 sería un buen candidato para investigaciones adicionales sobre sus actividades antagonistas contra , , y en estudios de campo y de plantas.