La mancha foliar del pepino, causada por , es una enfermedad emergente con una alta incidencia que causa daños severos a los pepinos a nivel global. Por lo tanto, se deben realizar esfuerzos para limitar la propagación y la infección de este patógeno, preferiblemente utilizando métodos respetuosos con el medio ambiente. En este estudio, se investigaron los efectos de la temperatura y la humedad en la esporulación de . in vitro e in vivo. La novedad de nuestro estudio se refiere a la observación de la producción y el tamaño de esporas, así como a la revelación de una correlación entre el tamaño de las esporas y la virulencia. En el medio de cultivo de papa dextrosa (PDA) y en el medio de cultivo de extracto de hoja de pepino (CEA), la temperatura desempeñó un papel crítico en la producción de esporas, que fue fuertemente influenciada tanto por la temperatura como por la humedad en hojas desprendidas y plántulas de pepino. La máxima producción de esporas se encontró a 30 grados C en PDA y a 25 grados C en CEA, hojas desprendidas de pepino y plantas vivas. Se observaron producciones de esporas más bajas con un cambio gradual de 5 grados C. Además, la mayor producción de esporas se encontró al 100% de humedad relativa (HR) en comparación con las otras humedades probadas. Además, se encontró que la humedad era el factor más importante que afectaba el tamaño de las esporas, representando el 83.09-84.86% de la varianza total en longitud y el 44.72-73.10% de la varianza total en ancho. Las esporas más largas y estrechas se formaron al 100% de HR, y las esporas más cortas y anchas se formaron al 75% de HR. Además, el resultado mostró que las esporas más grandes de eran más virulentas y las esporas pequeñas eran avirulentas. Nuestros hallazgos contribuirán al desarrollo de nuevas estrategias para la mitigación y el control efectivo de la mancha foliar del pepino.