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Un nuevo complejo: Un punto cuántico conjugado con una ARN polimerasa T7 activa
Para realizar estudios de molécula única de la ARN polimerasa T7, es crucial visualizar una ARN polimerasa T7 individual, por ejemplo, mediante una señal fluorescente. Presentamos un nuevo complejo que combina dos funciones moleculares diferentes, una ARN polimerasa T7 activa y una nanopartícula altamente luminiscente, un punto cuántico. El complejo tiene la ventaja de ambos constituyentes: el complejo puede circular a lo largo del ADN y ser visualizado simultáneamente, tanto a nivel de conjunto como de molécula única. El marcaje se realizó mediante la biotinilación in vivo de una ARN polimerasa T7 marcada con His y la posterior unión de un punto cuántico recubierto de estreptavidina. Nuestra técnica permite purificar fácilmente las ARN polimerasas T7 marcadas con puntos cuánticos a partir de los reactivos. Además, la conjugación no altera la funcionalidad de la polimerasa; conserva la capacidad de unirse y transcribir.
Autores: Mette, Eriksen; Peter, Horvath; Michael A., Sørensen; Szabolcs, Semsey; Lene B., Oddershede; Liselotte, Jauffred
Idioma: Inglés
Editor: Hindawi Publishing Corporation
Año: 2013
Disponible con Suscripción Virtualpro
Artículos
Categoría
Ingeniería y Tecnología
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 9
Citaciones: Sin citaciones
Hindawi
Journal of Nanomaterials
Volume 2013, Article ID 468105, 9 pages
https://doi.org/10.1155/2013/468105
Mette Eriksen 1, Peter Horvath 2, Michael A. Sørensen 3, Szabolcs Semsey 1, Lene B. Oddershede 1, Liselotte Jauffred 1
1 , Denmark
2 , Hungary
3 , Denmark
Academic Editor: Christophe Merlin
Contact: jnm@hindawi.com
Para realizar estudios de molécula única de la ARN polimerasa T7, es crucial visualizar una ARN polimerasa T7 individual, por ejemplo, mediante una señal fluorescente. Presentamos un nuevo complejo que combina dos funciones moleculares diferentes, una ARN polimerasa T7 activa y una nanopartícula altamente luminiscente, un punto cuántico. El complejo tiene la ventaja de ambos constituyentes: el complejo puede circular a lo largo del ADN y ser visualizado simultáneamente, tanto a nivel de conjunto como de molécula única. El marcaje se realizó mediante la biotinilación in vivo de una ARN polimerasa T7 marcada con His y la posterior unión de un punto cuántico recubierto de estreptavidina. Nuestra técnica permite purificar fácilmente las ARN polimerasas T7 marcadas con puntos cuánticos a partir de los reactivos. Además, la conjugación no altera la funcionalidad de la polimerasa; conserva la capacidad de unirse y transcribir.
Descripción
Para realizar estudios de molécula única de la ARN polimerasa T7, es crucial visualizar una ARN polimerasa T7 individual, por ejemplo, mediante una señal fluorescente. Presentamos un nuevo complejo que combina dos funciones moleculares diferentes, una ARN polimerasa T7 activa y una nanopartícula altamente luminiscente, un punto cuántico. El complejo tiene la ventaja de ambos constituyentes: el complejo puede circular a lo largo del ADN y ser visualizado simultáneamente, tanto a nivel de conjunto como de molécula única. El marcaje se realizó mediante la biotinilación in vivo de una ARN polimerasa T7 marcada con His y la posterior unión de un punto cuántico recubierto de estreptavidina. Nuestra técnica permite purificar fácilmente las ARN polimerasas T7 marcadas con puntos cuánticos a partir de los reactivos. Además, la conjugación no altera la funcionalidad de la polimerasa; conserva la capacidad de unirse y transcribir.