Se estableció y caracterizó en este estudio una nueva línea celular de bazo de lenguado japonés (JFSP) derivada del bazo de lenguado japonés. Las células JFSP crecieron rápidamente a 29 grados C, y la concentración óptima de suero bovino fetal en el medio L-15 fue del 15%. Las células se subcultivaron durante más de 80 pasajes. Las células JFSP tienen un número de cromosomas diploide de 2n = 68, que difiere del número de cromosomas del lenguado japonés diploide normal. Las células establecidas fueron susceptibles al virus de Bohle (BIV), al virus de la septicemia hemorrágica viral (VHSV), al virus de la rabia de Hirame (HIRRV), al virus de la necrosis hematopoyética infecciosa (IHNV) y al virus de la enfermedad de linfocistis (LCDV), como lo evidencian los diferentes grados de efectos citopáticos (CPE). La replicación del virus en las células JFSP fue confirmada por qRT-PCR y microscopía electrónica de transmisión. Además, la expresión de cuatro genes relacionados con la inmunidad, , , , y , se alteró diferencialmente tras la infección viral. Los resultados indicaron que las células experimentaron una respuesta inmune antiviral. La línea celular JFSP es una herramienta ideal para la virología. El uso de líneas celulares de peces para estudiar los genes inmunes y el mecanismo inmune de los peces y para aclarar el mecanismo inmune de los peces tiene una importante significación teórica y un valor de aplicación práctica para la prevención y tratamiento fundamental de las enfermedades de los peces.