Las bajas temperaturas restringen severamente el crecimiento de las plantas y la productividad agrícola, y explorar los mecanismos de tolerancia al frío es fundamental. Este estudio investigó los efectos combinados del gen del factor de transcripción derivado de la uva y el citoquinina sintética CPPU en la tolerancia al frío en tabaco transgénico. Bajo estrés por bajas temperaturas, las plantas de tabaco que sobreexpresan y son tratadas con CPPU mostraron un marchitamiento significativamente aliviado, mayores contenidos de clorofila y una tasa fotosintética neta mejorada en comparación con los controles. Estas plantas también mostraron una menor conductividad relativa y contenido de malondialdehído (MDA), mayor acumulación de prolina y actividades elevadas de dismutasa de superóxido (SOD), peroxidasa (POD) y catalasa (CAT), acompañadas de una reducción de especies reactivas de oxígeno (ROS), peróxido de hidrógeno (HO) y aniones superóxido (O). Los resultados confirman que el CPPU mejora sinérgicamente la tolerancia al frío a través de la estabilización de membranas, una defensa antioxidante mejorada y una capacidad fotosintética mantenida, proporcionando una base teórica para la aplicación racional de CPPU en el cultivo y manejo de uvas en condiciones de bajas temperaturas.