Este estudio investiga el impacto de la alta temperatura (HT) en el perfil metabólico, los parámetros de estrés oxidativo y la capacidad antioxidante del brócoli (var.) en diferentes etapas de desarrollo: microgreens, plántulas y dos órganos en la etapa madura (hojas y cabeza). Utilizamos métodos espectrofotométricos y cromatográficos para cuantificar las concentraciones de diferentes grupos y compuestos fenólicos individuales, ácidos -ascórbicos, azúcares solubles, proteínas, glucosinolatos, nitratos, pigmentos, parámetros de estrés oxidativo y capacidad antioxidante. El mayor número de variables analizadas que se vieron significativamente afectadas por HT se encontró en las cabezas de brócoli maduras, siendo el cambio más sustancial un aumento en la prolina del 168%. El menor número de variables susceptibles a HT (66%) se observó en las hojas de brócoli maduras. El cambio más dramático observado en este estudio fue un aumento en la prolina en plántulas del 587%. Los análisis estadísticos mostraron que la etapa de desarrollo juega un papel dominante en la configuración de los perfiles metabólicos, mientras que HT lo modula aún más. Basado en los parámetros medidos, la contribución promedio de la etapa de desarrollo a la varianza fue del 75%, mientras que la temperatura explicó el 39% de la varianza. La mayor proporción de varianza causada por la temperatura se observó en la prolina (92%), seguida de kaempferol (80%), clorofila / (76%), azúcares solubles (73%), flavonoides totales (65%), capacidad antioxidante medida por DPPH (58%) y la relación clorofila/carotenoides (56%). La temperatura explicó más varianza que la etapa de desarrollo para la concentración de azúcares solubles, ácidos hidroxicinámicos totales y taninos totales, lo que indica un papel importante de estos grupos de metabolitos en la respuesta del brócoli a HT. La interacción de la etapa de desarrollo y la temperatura explicó más varianza que la etapa de desarrollo sola para la concentración de proantocianidinas totales, ácidos hidroxicinámicos y ácidos fenólicos. Estos hallazgos subrayan la complejidad de la regulación metabólica en el brócoli y enfatizan la importancia de considerar tanto la etapa de desarrollo como las condiciones ambientales al evaluar sus propiedades nutricionales y funcionales.